项目简介：   　　

　　本项目属于生物科学中的病毒学研究领域。主要针对严重危害国民经济发展、社会和谐稳定和人类生命健康的重大烈性传染性人兽共患病，特别是禽流感、SARS、狂犬病等病毒性人兽共患病，开展病原基础和应用基础层面的相关研究。

　　项目总体科技内容是建立高效、系统、共享的病原－载体－基因表达－模型测试－快速诊断技术平台，夯实我国人兽共患病综合防制基础。具体为：从全国各地收集临床病料，分离鉴定禽流感、SARS、狂犬病等多种重要人兽共患病病原，开展全国范围内病原生态学与流行病学调查，进行生物特性鉴定，分子背景分析和遗传变异规律研究，建立病原毒株库；进行多种病毒主要保护性抗原基因和代表株全基因组克隆或感染性克隆，建立基因储备库，并进行生物信息学分析；构建大肠杆菌、酵母、杆状病毒、痘苗病毒、鸡痘病毒和DNA等多种真原核表达系统，表达功能基因或构建重组体，进行结构、功能、免疫、模型和机制研究；建立了检测基因、抗原、抗体快速诊断方法；构建了多种单价、多价、多表位及偶联佐剂候选基因工程疫苗，进行了临床实验免疫研究。

　　项目科学价值：在国内早期启动了重大、烈性人兽共患传染病病原基础及诊断和防治研究，率先将"动物的健康就是人类的安全"理念融入科学研究中，从理论上探究了人－禽(哺乳动物)病原生态分布相关性、病原基因组进化变异特点、不同功能基因用于诊断或疫苗研制的可行性等问题，从技术上突破了基因表达与诊断检测瓶颈，建立了毒株库、基因库、系列基因表达系统平台，探索了构建安全、廉价基因工程疫苗可行模式，建立了快速诊断方法，为我国人兽共患病早期预警和综合防控奠定坚实基础，提供有效技术储备。

　　本研究获得国家973、863、科技攻关、自然基金重点、面上及省市科技发展计划等15个项目资助，发表论文83篇， 其中SCI收录2篇，EI收录10篇，论文他引96次，获国家发明专利1项，并为军队重点学科和军队重点实验室建设作出了重要贡献。

主要发现点：  1.通过对我国鸡痘病毒进行基因组背景分析，克隆非必需区基因、人工设计合成启动子，在国内外率先自主构建了单向和双向重组鸡痘病毒表达载体，不仅为我国重组载体研究提供了新思路，而且为开发研制新型、高效、安全的禽用疫苗、动物疫苗以及其他非禽属疫苗开辟了全新领域，建立了基础平台。（分子病毒学，代表论文编号2）

2.应用自主构建的鸡痘病毒真核表达系统，首次构建了表达狂犬病糖蛋白基因、口蹄疫病毒P1-2A基因、共表达新城疫病毒F基因和传染性法氏囊病病毒VP0基因的单价和多价重组鸡痘病毒，并取得了国家生物安全委员会批文，对新城疫、传染性法氏囊病及口蹄疫的防制具有重要指导意义和实用价值，国内外未见相关报道。（分子病毒学，代表论文编号3、4）

3. 在国内外率先自主构建了重组痘苗病毒表达载体，解决了国内外痘苗病毒载体不能高效表达的难题，并首次应用痘苗病毒表达载体构建了狂犬病基因工程候选疫苗。（分子病毒学，代表论文编号1、5）

4.首次在我国东北地区分离出新城疫自然弱毒株，对该毒株进行了系统的生物学和分子生物学特性鉴定，并以此为基础创制了新城疫弱毒候选疫苗，其具有免疫原性好、使用方便、价格低等特点，对于我国养鸡业大量分散养殖的国情，该弱毒疫苗将对控制和预防新城疫的发生具有重要意义。（兽医微生物学，代表论文编号6）

5.在国内外首次提出应用新城疫病毒结构基因而不是全病毒构建安全的治疗性核酸疫苗，通过建立细胞模型，对其信号转导、分子致病机制及细胞毒性进行了研究，结果表明该侯选疫苗对细胞毒性低，且能诱发强的细胞免疫反应，并获得专利1项。（分子病毒学，代表论文编号7、8）

6.根据吉林省人群分离SARS冠状病毒基因组背景，创制了抗SARS病毒N蛋白的重组核酸侯选疫苗，为SARS疫苗的研究提供了一条新途径。（分子病毒学，代表论文编号9）

7.在我国早期启动大肠杆菌、杆状病毒、毕赤酵母等表达体系，进行了禽流感、SARS等病毒的基因组蛋白表达与调控机制研究，为疫病早期预警、快速诊断和综合防控积累了理论与技术平台。（分子病毒学，代表论文编号10）

主要完成人：

1.  金宁一

　　进行所有课题的立项、前期设计、过程跟踪监督以及各个环节的的介入和参与，主要完成具有自主知识产权的鸡痘病毒表达载体平台的建设。投入该项研究的工作量占本人工作量的80%，对1、2、3、4、5、6、7发现点做出贡献，10篇代表性论文的通讯作者。

2.  金扩世

　　参加有关新城疫、SARS、口蹄疫等项目的前期设计、实验指导，主要完成新城疫病毒、SARS冠状病毒分离鉴定、基因克隆表达，新城疫、口蹄疫基因工程疫苗的应用等。对1、2、4、7发现点做出贡献，投入本项研究的工作量占本人工作量的80%，代表性论文3、6、10的作者。

3.  鲁会军

　　参加有关禽流感、SARS、口蹄疫等项目的前期设计、实验指导，主要完成禽流感病毒、口蹄疫病毒分离鉴定、基因克隆表达，禽流感、口蹄疫快速诊断试剂及基因工程疫苗的研制及应用等。对2、4、6、7发现点做出贡献，投入本项研究的工作量占本人工作量的80%，代表性论文10的第一作者。

4.   李昌

　　参加有关口蹄疫、禽流感等项目的前期设计，主要完成口蹄疫及禽流感基因工程疫苗研制与应用等。对2、6、7发现点做出贡献，投入本项研究的工作量占本人工作量的50%，代表性论文2的作者。

5.  李霄

　　参加有关新城疫、禽流感等项目的研究，主要完成新城疫病毒分离鉴定、基因克隆表达，新城疫病毒抗肿瘤研究等。对2、5、7发现点做出贡献，投入本项研究的工作量占本人工作量的50%，代表性论文7的第一作者。

10篇代表性论文：

1.   Construction of vaccinia virus A-type inclusiom body protein, tandemly repeated mutant 7.5kDa protein,and hemagglutinin gene promoters support high levels of expression/ Arch Virol

2.   Sequence analysis of a 7.3 Kb BamHI genomic fragment of fowlpox virus strain 282E4/Chinese Science Bulletin

3.   口蹄疫病毒二价DNA疫苗的构建及实验免疫研究/高技术通讯

4.   共表达新城疫病毒F基因、传染性法氏囊病毒VP0基因等重组鸡痘病毒的抗原性和免疫原性/中国兽医学报

5.   不同启动子对重组痘苗病毒中的表达狂犬病病毒糖蛋白基因的影响/中国兽医学报

6.   新城疫病毒弱毒株分子生物学特性的研究/中国预防兽医学报

7.   联合应用凋亡素基因、新城疫病毒HN基因及IL-18 基因对黑色素瘤的抑制效应研究/高技术通讯

8.   新城疫病毒HN基因与鸡贫血病毒VP3 基因对裸鼠荷HCT肿瘤的治疗/中国肿瘤生物治疗杂志

9.   SARS病毒核衣壳蛋白的表达与鉴定/高等学校化学学报

10.  口蹄疫病毒3D基因在重组杆状病毒中的表达及检测/中国预防兽医学报